Mai Thành tốt nghiệp cùng nghệ sĩ Hương Xuân là cặp đôi đạt điểm thủ khoa, được các đạo diễn, các bầu gánh hát mời về Đoàn.[4] Được giữ lại trường, ông học thêm một năm sư phạm trở thành phó giảng rồi giáo viên Cải lương từ năm 1963 đến 1976.[1]

Mai Thành từng tham gia đóng các vở cải lương Khi người điên biết yêu, Giai nhân và ác quỷ, Vó ngựa truy phong… Vào những năm 1970, ông cùng Thoại Miêu, Ngọc Hoa, Tú Trinh, Ngọc Đan Thanh được khán giả biết đến qua vở cải lương "Trần Minh khố chuối” qua sóng Đài Phát thanh Sài Gòn.[5][cần nguồn tốt hơn] Năm 1976, ông chuyển hướng sang kịch nói, hoạt động chính ở Đoàn kịch nói Kim Cương, một số vở kịch được dàn dựng để chiếu trên truyền hình.[6] Năm 1981, nghệ sĩ Mai Thành bắt đầu đóng phim với vai giám đốc Tư Trực trong "Biển sáng", thay thế cho Trần Phương[7] bộ phim do hãng phim Tổng Hợp sản xuất. Năm 1986 ông rời đoàn Kim Cương để vào đoàn cải lương Sài Gòn 2, sau hai năm diễn cải lương, ở phần cuối sự nghiệp, ông chuyển sang lĩnh vực điện ảnh.[1]

Thập niên 1990, ông được chú ý trên màn ảnh với các phim Xóm nước đen, Ngày ấy quê tôi, Người đẹp Tây Đô, Đất phương nam... Ngoài diễn xuất, ông còn lồng tiếng cho các bộ phim và giảng dạy. Phim cuối cùng ông tham gia là vai thầy Nguyễn trong Long Thành cầm giả ca năm 2010.[8] Tính đến năm 2011, Mai Thành đã góp mặt trong hơn 150 bộ phim lớn, nhỏ cùng nhiều MV.[1]